Eksperiment for å utføre grunnleggende farging av bakterier for å observere dens form, størrelse og arrangement

Målet er å utføre enkel grunnleggende farging av bakterier, for å observere form, størrelse og arrangement.

Hensikt:

Det er ikke mulig å observere den naturlige formen, størrelsen og arrangementet av bakterier ved grunnleggende farging, da disse egenskapene forvrenges ved varmefiksering.

Dessuten er enkelte bakterier (f.eks. Spirilli) vanskelige å bli farget.

Dermed utføres negativ farging av to årsaker som følger:

(en) For å observere den naturlige formen, størrelsen og arrangementet av bakterier, da det ikke er gjort noen varmefiksering her.

(B) Å observere de bakteriene, som er vanskelig å bli farget?

Prinsipp:

Bakterieceller bærer negativ ladning på overflaten, på grunn av hvilken de er omgitt av kationer, som Na + og K + (Figur 5.9). Ved sur farging brukes en sur farge som ioniserer i et anionisk kromogen (negativt ladet fargestoff ion) og en kation.

De negativt ladede kromogenene blir avstøt av overflatenes negative ladninger på bakteriecellene, på grunn av hvilken fargestoffet ikke kan trenge inn i cellen. Nå er de ufarvede cellene enkelt å skille mot den fargede bakgrunnen.

Materialer som kreves:

Slides, sløyfe, sur flekk (eosin / nigrosin), buljong / plate / skrå kultur av bakterier, mikroskop, nedsenking olje.

Fremgangsmåte:

1. Et lysbilde rengjøres ordentlig under kranvann, slik at vann ikke forblir som dråper på overflaten (Figur 5.10).

2. Det vedleggende vannet tørkes ut med bibulous papir og lysbildet lufttørkes.

3. En liten dråpe av den sure flekken (nigrosin / eosin) er plassert nær den ene enden av lysbildet.

4. En sløyfe steriliseres over flammen og avkjøles. Aseptisk overføres en sløyfe av bakterier fra agarplaten eller skrå eller en sløyfe av bakteriers suspensjon fra en væskebuljong til dråpen av flekk. En suspensjon av bakterier i flekken gjøres ved forsiktig å blande bakteriebølgen i dråpeflaten, slik at dråpen ikke sprer seg.

5. Et annet rent lysbilde holdes i en vinkel på 30 ° til det første lysbildet, på en slik måte at en smal kant av den tidligere berører overflaten av den senere mot enden uten flekkfallet.

6. I den tilbøyelige posisjonen trekkes det andre lysbildet frem mot flekkdråpen, til kanten bare rører dråpen og dråpen blir spredt langs kanten.

7. I den tilbøyelige posisjonen skyves det andre lysbildet bakover for å danne et tynt smøring av bakterier.

8. Smøret er lufttørket. Varmefiksering er ikke ferdig her.

9. Lysbildet er klippet til mikroskopets stadium og smøret observert under lavt strøm og høyt tørrmål.

10. En dråpe neddykkingsolje blir satt på smeten.

11. Smøret er observert under olje-nedsenkningsmål.

Observasjoner (Under Oljedempingsmål):

1. Form av bakterier:

Sfærisk (kokkus)

Stangformet (baciller)

Comma-like (vibrio)

Spiral (spiroketene)

2. Arrangement av bakterier:

Par (diplobacillus / diplococcus)

I fours (tetrads)

I kjeder (streptokokker / streptobacillus)

Drue-lignende klynger (stafylokokker)

Cuboidal (sarkin eller oktett)

3. Størrelse på bakterier:

Ved øyeberegning gjør du tegning av feltet under olje-nedsenkningsmål.