Fluorescens-antistoffteknikk for deteksjon av en bestemt bakterier i en prøve

Les denne artikkelen for å lære om Prinsipp Fluorescens-antistoffteknikk for gjenkjenning av bestemte bakterier i en prøve!

Målet er å lære prinsippet om immunfluorescens eller fluorescens-antistoffteknikk for å påvise bestemte bakterier i en prøve.

Fluorescens-antistoff eller immunfluorescens teknikk er en rask og pålitelig prosedyre for påvisning av bestemte bakterier i en prøve. Et antall antistoffer, merket med fluorescerende fargestoffer, så som fluoresceinisocyanat eller isotiocyanat, hver spesifikke for spesielle bakterier, er tilgjengelige.

En av disse merkede antistoffene, som er spesifikke for de spesifikke bakteriene som skal detekteres, blir tilsatt i dråper til et varmefast smear av den ukjente bakterieeksemplet på et lysbilde og spredes forsiktig over overflaten av smeten. Et fuktet filterpapir er plassert inne i en petriskål.

Deretter plasseres lysbildet i det på en U-formet glassstang og inkuberes ved 25 ° C i 35 minutter. Overflødig antistoff på smeten vaskes bort med 1% fosfatbuffert saltvann. Lysbildet er nedsenket i en Coplin-krukke inneholdende 1% fosfatbuffert saltvann ved 25 ° C i 10 minutter. Lysbildet er tørket av bibulous papir. En dråpe glycerol tilsettes til smeten. Den er dekket med et deksel og undersøkt under et fluorescensmikroskop.

Hvis bakteriene som er spesifikke for det merkede antistoffet som er til stede, er tilstede i den ukjente bakterieeksemplet, dannes et antigen-antistoffkompleks (her er bakterier antigenet). Som antistoffet er merket med en fluorescerende substans, utsender antigen-antistoffkomplekset fluorescens, når det observeres under fluorescensmikroskop. Hvis bakterier som er spesifikke for antistoffet er fraværende, blir det fluorescerende antistoff vasket bort og fluorescens observeres ikke.