29 Utstyrets laboratorier for mikrobiologi bør ha

Målet er å studere arbeidets prinsipp og drift av utstyr som brukes i mikrobiologi laboratoriet. Et moderne mikrobiologilaboratorium skal være utstyrt med følgende utstyr.

1. Varmluftsovn for sterilisering:

Den brukes til sterilisering av glassvarer, som for eksempel rør, pipetter og petriskål. Slike tørre sterilisering skjer kun for glassvarer. Flytende stoffer, slik som preparerte medier og saltoppløsninger, kan ikke steriliseres i ovnen, ettersom de taper vann på grunn av fordampning.

Glasset er sterilisert ved 180 ° C i 3 timer. En ovn (Figur 3.2) har en termostatstyring, ved hjelp av hvilken den nødvendige konstante temperaturen kan oppnås ved prøve og feil. Termostatvelgeren er omtrentlig og den nøyaktige temperaturen leses ved å innføre et termometer i ovnen eller på et innebygd L-formet termometer.

I en moderne ovn (Figur 3.3) er det en digital temperaturdisplay og automatisk temperaturregulator for å stille ønsket temperatur lett. Tiden er satt av en digital timer. Etter å ha lastet glasset er døren lukket og stekeovnen slått på.

Den nødvendige temperaturen er innstilt. Etter at ovnen har oppnådd temperatur, er den nødvendige tiden for sterilisering satt på timeren. Ovnen slår seg av automatisk etter den innstilte tiden. Ovnen er åpnet, bare etter at temperaturen kommer nær romtemperaturen. Ellers, hvis døren åpnes, mens innsiden av ovnen fortsatt er veldig varm, kan kald luft haste inn og knekke glasset.

2. Tørking Ovnen:

For fremstilling av visse reagenser må glassvaren, etter riktig rengjøring og skylling med destillert vann, tørkes. De tørkes i tørkeovnen ved 100 ° C til glasset tørker helt opp.

3. Autoklav:

Autoklav er kjernen til et mikrobiologi laboratorium. Det brukes ikke bare til sterilisering av flytende stoffer, for eksempel preparerte medier og saltvann (fortynningsmiddel) løsninger, men også for sterilisering av glassvarer, når det er nødvendig.

Den har samme arbeidsprinsipp som en tett trykkkomfyr. Maksimal temperatur som kan oppnås ved kokende vann i en åpen beholder er 100 ° C (vannkokingpunkt).

Denne temperaturen er tilstrekkelig til bare å dræpe ikke-sporeformerne, men det er vanskelig å drepe sporeformende bakterier ved denne temperaturen, da de unnslipper ved å danne varmebestandige sporer. Det tar svært lang tid å drepe sporene ved denne temperaturen.

På den annen side, når vann kokes i en lukket beholder, på grunn av økt trykk inne i det, øker kokpunktet og dampstemperaturen som er mye over 100 ° C kan oppnås. Denne høye temperaturen er nødvendig for å drepe alle bakterier, inkludert de varmebestandige sporeformere. Damptemperaturen øker med økt damptrykk (tabell 3.1).

Tabell 3.1: Temperaturer oppnås ved forskjellige damptrykk:

Ved drift av en standard vertikal autoklav, (Figur 3.4) blir tilstrekkelig vann hellet inn i det. Hvis vannet er for mindre, blir bunnen av autoklaven tørket under oppvarming og ytterligere oppvarming skader det.

Hvis det har innebygget vannvarmeelement, (Figur 3.5) skal vannnivået opprettholdes over elementet. På den annen side, hvis det er for mye vann, tar det lang tid å nå ønsket temperatur.

Materialene som skal steriliseres, er dekket med håndflate og er plassert på en aluminium- eller treramme som holdes på bunnen av autoklaven, ellers hvis materialene forblir halvt nedsenket eller flytende, taster de under koking og vann kan komme inn. Autoklaven er lukket helt lufttett bare og holder dampavlastningsventilen åpen.

Deretter blir det oppvarmet over flammen eller ved det innebygde varmeelementet. Luft inne i autoklaven bør få lov til å rømme helt gjennom denne ventilen. Når vanndamp ser ut til å rømme gjennom ventilen, er den lukket.

Temperatur og trykk innvendig fortsetter å øke. Trykkøkningen observeres på trykkbryteren. Vanligvis gjøres sterilisering ved 121 ° C (et trykk på 15 pounds per kvadrat tomme, dvs. 15 psi) i 15 minutter. Den nødvendige tiden vurderes fra punktet når det nødvendige temperaturpresset oppnås.

Når ønsket temperaturtrykk er oppnådd, opprettholdes det ved å kontrollere varmekilden. Etter den angitte tiden (15 minutter), blir oppvarming avbrutt og damputløsningsventilen åpnet litt. Ved full åpning umiddelbart, kan det hende at væsker spres ut av beholderne på grunn av plutselig trykkfall.

Gradvis åpnes damputløsningen mer og mer, slik at all damp slippes ut. Autoklaven åpnes først etter at trykket faller tilbake til normalt atmosfærisk trykk (0 psi). Autoklaven skal aldri åpnes, når det fortsatt er trykk inni. De varme steriliserte materialene fjernes ved å holde dem med en ren ren klut eller asbestbelagte håndhandsker.

I tilfelle en dampkappet horisontal autoklav, produserer en kjele dampen (Figur 3.6). Den frigjøres ved et bestemt trykk, inn i det ytre kammeret (jakke). Luft får lov til å unnslippe og deretter lukkes ventilasjonsventilen.

Den varme jakken oppvarmer det indre kammeret og derved oppvarmer materialene som skal steriliseres. Dette forhindrer kondensasjon av damp på materialene. Nå slippes damp under trykk fra jakken inn i det indre kammeret, og luft får lov til å flykte fra det.

Deretter lukkes dampventilen sin. Dampen under trykk i det indre kammer når temperaturer over 100 ° C, som kan sterilisere materialene som holdes inne i det. Autoklaven har også automatisk lukkesystem, dvs. med mindre temperatur og trykk kommer ned i nærheten av romforhold, kan døren ikke åpnes.

Foruten trykkvelgeren har den også separat temperaturbryter for å indikere temperaturen i det indre kammeret. Videre opprettholder autoklaven temperatur og trykk automatisk og slår av etter den angitte tiden for sterilisering.

4. Mikrobiologisk inkubator:

Mektig vekst av mikrober oppnås i laboratoriet ved å dyrke dem ved passende temperaturer. Dette gjøres ved å inokulere den ønskede mikrobe i et egnet dyrkningsmedium og deretter inkubere det ved temperaturoptimal for veksten.

Inkubasjon gjøres i en inkubator (Figur 3.7), som opprettholder en konstant temperatur spesielt egnet for veksten av en bestemt mikrobe. Ettersom de fleste mikroorganismer som er patogene til mennesker, vokser kraftig ved kroppstemperaturen hos normalt menneske (dvs. 37 ° C), er den vanlige inkuberingstemperaturen 37 ° C.

Inkubatoren har en termostat, som opprettholder en konstant temperatur, sett i henhold til kravet. Temperaturavlesningen på termostaten er omtrentlig. Nøyaktig temperatur kan ses på termometeret fast på inkubatoren. Nøyaktig temperatur, per krav, settes ved å dreie termostatknappen ved prøve og feil og notere temperaturen på termometeret.

De fleste av de moderne inkubatorene (Figur 3.8) er programmerbare, som ikke krever prøve- og feiltemperaturinnstilling. Her angir operatøren ønsket temperatur og ønsket tidsperiode.

Inkubatoren opprettholder den automatisk i henhold til dette. Fuktighet tilføres ved å plassere et beger med vann i inkubatoren i vekstperioden. Et fuktig miljø forsinker dehydrering av media og derved unngår falske eksperimentelle resultater.

5. BOD-inkubator (lavtemperaturinkubator):

Noen mikrober skal dyrkes ved lavere temperaturer for spesielle formål. BOD lavtemperatur inkubatoren (Figur 3.9), som kan opprettholde temperaturer fra 50 ° C til så lavt som 2-3 ° C, brukes til inkubering i slike tilfeller.

Den konstant ønskede temperaturen stilles inn ved å dreie bryteren på termostaten. Rotasjon av termostatknappen beveger en nål på et hjul som viser omtrentlig temperatur. Nøyaktig ønsket temperatur oppnås ved å rotere knotten fint ved prøving og feiling og notere temperaturen på termometeret fastgjort på inkubatoren.

De fleste av de moderne BOD-inkubatorene (Figur 3.10) er programmerbare, som ikke trenger prøve- og feiltemperaturinnstilling. Her angir operatøren ønsket temperatur og ønsket tidsperiode. Inkubatoren opprettholder den automatisk i henhold til dette.

6. Kjøleskap (kjøleskap):

Det fungerer som et lager for termo labile kjemikalier, løsninger, antibiotika, serum og biokjemiske reagenser ved kjøligere temperaturer og til og med ved temperaturer under null (under 0 ° C). Lagerkulturer av bakterier lagres også i den mellom subkulturperioder. Den brukes også til lagring av steriliserte medier for å forhindre dehydrering.

7. Dypkjøleskap:

Det brukes til å lagre kjemikalier og bevare prøver ved svært lave temperaturer under null.

8. Elektronisk topp-balanse:

Den brukes til veiing av store mengder media og andre kjemikalier, der nøyaktig veiing ikke er av stor betydning.

9. Elektronisk Analytisk Balanse:

Det brukes til å veie små mengder kjemikalier og prøver nøyaktig og raskt.

10. Dobbeltspor Analytisk balanse:

Det brukes til å veie kjemikalier og prøver nøyaktig. Veiing tar mer tid, som den kun brukes i nødstilfelle.

11. Destillert vannanlegg:

Vann brukes til fremstilling av media og reagenser. Hvis mediet fremstilles ved bruk av kranvann, kan de kjemiske urenheter som er tilstede i det, forstyrre veksten av mikroorganismer i media. Dessuten er jo høyere bakteriens innhold i media, desto lengre er tiden som kreves for sterilisering, og større er sjansen for overlevelse av noen bakterier.

Destillert vann, men ikke bakteriefri, inneholder mindre antall bakterier. Det er hvorfor; Det er foretrukket ved fremstilling av mikrobiologiske medier. Det brukes også til fremstilling av reagenser, fordi de kjemiske urenheter som finnes i kranvann, kan forstyrre riktig reagenskjemikalier.

Ettersom produksjon av destillert vann ved Liebig-kondensatoren er en tidsprosess, er det i de fleste laboratorier laget av "destillert vannplanter". Vanligvis er en destillert vannfabrikk laget av stål eller messing. Det kalles også destillert vann fortsatt.

Den har en innløp for å være koblet til vannkranen og to uttak, en for destillert vann å slippe inn i en beholder og den andre for strømmen ut av varmt kjølevann inn i vasken. Det er fortsatt installert på veggen. Den er oppvarmet av innebygde elektriske varmeelementer (nedsenkningsvarmer).

Den fungerer fortsatt effektivt når vanninnstrømningen er justert slik at temperaturen på kjølevannet som strømmer ut fra det som er stille i vasken, ikke er for høyt eller for lavt, dvs. varmt vann skal strømme ut. Destillert vann kan inneholde spor av metaller korrodert fra stål- eller messingbeholderen.

For å få metallfritt destillert vann benyttes glassdestillasjonsapparat og enda bedre er kvarts destillasjonsapparat. For et mikrobiologilaboratorium er imidlertid et stål- eller glassdestillasjonsapparat tilstrekkelig. For presisjonsanalyser brukes dobbelt- eller trippel-destillert vann.

12. Ultrapure vannrensingssystem:

For presisjonsanalyser, nå-dager, i stedet for å bruke dobbelt- eller trippel-destillert vann, brukes mikrofiltrert vann. Ved destillert vann er det sjanse for at få flyktige stoffer som er til stede i vannet, blir forflyttet under oppvarming av vannet og deretter kondensert til det oppsamlede vannet.

Det kan således være spor av slike stoffer i destillert vann. For å overvinne dette, brukes ultrapure vann. Her får vann til å passere gjennom meget fine mikroskopiske porer, som beholder den mikroskopiske suspendert partikkelen, inkludert mikroberene.

Deretter passerer vannet gjennom to kolonner av ionbytterharpikser. Anionbytterharpiks adsorberer bildetekster som er tilstede i vannet, mens bildetekstbytterharpiks adsorber anionene. Vannet som kommer ut er ekstremt rent.

13. Homogenisator:

For mikrobiologisk analyse brukes væskeprøver direkte, mens faste prøver må blandes grundig med fortynningsmidler (vanligvis fysiologisk saltvann) for å få en homogen suspensjon av bakterier. Denne suspensjonen antas å inneholde bakterier homogent.

Blandingen av faste prøver og fortynningsmidler gjøres ved hjelp av en homogenisator, hvor en motor roterer et løpehjul med skarpe kniver med høy hastighet inne i den lukkede homogenisatorboks som inneholder prøven og fortynningsmiddelene. Den har en hastighetsregulator for å kontrollere rotasjonshastigheten til pumpehjulet.

I enkelte laboratorier gjøres blandingen manuelt av sterilisert støpe og mørtel. I moderne laboratorier brukes en disponibel pose, inne i hvilken den faste prøve og væskefortynningsmidler settes aseptisk og blandes mekanisk ved peristaltisk virkning av en maskin på posen. Denne maskinen kalles stomacher.

14. pH-meter:

En pH-meter er et instrument for å bestemme pH i flytende medier, væskeprøver og buffere. Den har en glass-pH-elektrode. Når den ikke er i bruk, bør den holdes halvt nedsenket i vann som er inneholdt i et lite beger og fortrinnsvis dekkes av en bjellkule for å unngå støvakkumulering i vannet og tap av vann gjennom fordampning.

Før bruk kalibreres måleren med to standardbuffere med kjent pH. Vanligvis er buffere med pH 4, 0, 7, 0 og 9, 2 kommersielt tilgjengelige. Instrumentet er slått på og igjen i 30 minutter for å varme opp. Temperaturkalibreringsknappen roteres til temperaturen på løsningene hvis pH er målt.

Derefter dyppes elektroden inn i bufferen (pH 7, 0). Hvis lesingen ikke er 7, 00, blir pH-kalibreringsknappen rotert til lesingen er 7, 00. Derefter dyppes elektroden i en annen buffer (pH 4, 0 eller 9, 2).

Hvis lesningen er den samme som bufferenes pH, fungerer instrumentet riktig. Ellers aktiveres elektroden ved å dyppe i 0, 1 N HC1 i 24 timer. Etter kalibrering bestemmes pH av prøvene ved å dyppe elektroden inn i dem og merke lesingen.

Hver gang, før du dypper ned i en hvilken som helst løsning, skal elektroden skylles med destillert vann. Prøvene bør ikke inneholde noen suspenderte klissete materialer, noe som kan danne et belegg på elektrodens spiss og redusere følsomheten.

De gamle modellens pH-målere har dobbelte elektroder (en av dem som fungerer som referanselektrode), mens nye modeller har en enkelt kombinert elektrode. Videre, for å overvinne problemet med temperaturkorreksjon, er nå pH-målere med automatisk temperaturkorrigering tilgjengelig.

Her settes også en annen "temperaturelektrode" inn i løsningen sammen med pH-elektroden, som måler temperaturen på løsningen og korrigerer automatisk påvirkning av temperaturvariasjoner.

Sofistikert pH-målere har en enkelt gelelektrode. Slike elektroder har svært liten sjanse for brudd, da de er nesten helt innelukket i et hardt plasthus utenom spissen. Spissen har både pH- og temperatursensorer.

Dessuten er de enkle å vedlikeholde, da de ikke krever konstant dypping i destillert vann, fordi elektrodespissen er lukket med en plasthette som inneholder mettet løsning av kaliumklorid, når den ikke er i bruk. Imidlertid bestemmes pH ved fremstilling av mikrobiologiske medier ved hjelp av smale pH-papirer og justeres til ønsket pH ved å tilsette syrer eller alkalier etter behov.

15. varmeplate:

Kokeplate brukes til oppvarming av kjemikalier og reagenser. Kokeplaten er laget av en jernplate som blir oppvarmet av et elektrisk varmeelement fra under. Den nødvendige oppvarmingsgraden er oppnådd av en regulator.

16. Risting vannbad:

Noen ganger er det nødvendig med oppvarming ved meget presise temperaturer. Slike presise temperaturer kan ikke oppnås i en inkubator eller ovn, der temperaturen svinger, men litt. Imidlertid kan presise temperaturer opprettholdes i et vannbad, som gir en stabil temperatur.

Et vannbad består av en beholder som inneholder vann, som oppvarmes av elektriske varmeelementer. Den nødvendige vanntemperaturen oppnås ved å øke eller redusere oppvarmingshastigheten ved å dreie termostaten ved prøve og feil.

I et rystende vannbad oppvarmes stoffet til ønsket temperatur og samtidig skylles det konstant. Risting gjøres av en motor som roterer og beveger beholderne frem og tilbake i hver rotasjon. Raskeshastigheten styres igjen av en regulator. Shaking agitates stoffet og øker prosessens hastighet.

De fleste moderne vannbad er programmerbare og trenger ikke prøve- og feiltemperaturinnstilling. En ønsket vanntemperatur kan opprettholdes over en ønsket tidsperiode ved å programmere tilsvarende. Den brukes til dyrking av bakterier i kjøttmedium ved en bestemt temperatur.

17. Quebec Colony Counter:

Ved oppregning av bakterier i prøver, antas det at en enkelt bakterie gir opphav til en synlig koloni når den vokser på en plate med størknet næringsmedium. Således, ved å telle antall kolonier, kan antall bakterier i en prøve estimeres.

Noen ganger er kolonier svært små og for mye overfylte, noe som gjør det vanskelig å telle. Telling blir lett, når en mekanisk håndteller, kalt Quebec kolonisteller (Figur 3.11), blir brukt. Det deler platen i flere firkantede divisjoner, og koloniene forstørres 1, 5 ganger med et forstørrelsesglass, noe som gjør teller enkelt.

18. Elektronisk kolonisteller:

Elektronisk kolonisteller er av to typer:

(1) Håndholdt elektronisk kolonisteller og

(2) Elektronisk koloniteller på bordet.

Den håndholdte elektroniske kolonitelleren er en penne-stil koloniteller med en blekkfilt-markør. For å telle kolonier av bakterier dyrket i en petriskål, holdes den i en omvendt posisjon, slik at koloniene er synlige gjennom petrifatets underkant.

Koloniene er merket ved å berøre glassoverflaten på petriskålen med kolonistavets felt-spiss. Dermed er hver koloni preget av en prikk laget av blekk av felt-spissen på bunnflaten på petriskålen. I en enkelt bevegelse markerer den elektroniske kolonistelleren, teller og bekrefter med en pipelyd.

Kumulativ antall kolonier vises på en firesifret LED-skjerm. Ved bordtabell elektronisk kolonisteller er petriskålen som inneholder bakteriekolonier plassert på et opplyst stadium og tellebaren er deprimert. Det presise antallet kolonier vises umiddelbart på en digital utlasting.

19. Magnetisk omrører:

Ved fremstilling av løsninger krever visse kjemikalier omrøring i lang tid, for å bli oppløst i visse oppløsningsmidler. Magnetisk omrører brukes til å oppløse slike stoffer raskt og enkelt. En liten teflonbelagt magnet, kalt "omrøringsstang", settes i en beholder som inneholder løsningsmidlet og løsningsmidlet.

Deretter plasseres beholderen på plattformen av magnetomrøreren, under hvilken en magnet roterer ved høy hastighet av en motor. Tiltrukket av den roterende magneten roterer den teflonbelagte magneten inne i beholderen og rører innholdet. Nå løses løsningen raskt.

Teflonbelegget forhindrer at magneten reagerer med løsningen, som kommer i kontakt med den. Etter fullstendig oppløsning blir den teflonbelagte magneten fjernet fra løsningen ved hjelp av en lang retriever, kalt "stirring bar retriever".

20. Sonicator:

Det brukes til å ødelegge celler ved hjelp av høyfrekvente bølger.

21. Vortex Mixer:

Det er et instrument som brukes til grundig blanding av væsker i reagensrør. Den har en rotor, hvis hastighet kan styres. På toppen av rotoren er en skumgummi topp. Når bunnen av et reagensrør presses på denne skumgummitoppen, begynner rotoren å rotere og derved rotere bunnen av reagensrøret med høy hastighet.

På grunn av sentripetalkraft blir blandingen grundig blandet. Det er spesielt nyttig under seriell fortynning i oppregning av bakterier, som krever homogen suspensjon av bakterieceller.

21. Laminar Flow Chamber:

Det er et kammer (Figur 3.12) som brukes til aseptisk overføring av steriliserte materialer, så vel som for inokulering av mikrober. Støvpartikler som flyter i luftbåthavens mikrober. Disse mikrobebelastede støvpartiklene kan komme inn i det steriliserte medium og forurense dem når de åpnes i korte perioder under inokulering av mikrobe eller overføring fra en beholder til en annen.

For å overvinne dette, når inokuleringen gjøres i friluft, steriliseres luften i det lille inokuleringsområdet av en bunsenbrenners flamme. Den oppvarmede luften blir lys og beveger seg oppover, slik at støvpartiklene faller på mediet under kort åpningsprosess.

For ytterligere å redusere sjansen for forurensning av den mikrobe-belagte luften, benyttes et laminært strømningskammer. Det er et glassmontert kuleformet kammer. En luftblåser blåser luft fra omgivelsene og passerer den gjennom et HEPA filter (High Efficiency Particulate Air filter) for å gjøre det støvfritt (mikrobrikkfritt).

Denne mikrobefri luften passerer gjennom kammeret på en laminar måte og kommer ut fra kammeret gjennom den åpne inngangsdøren. Denne laminare strømmen av mikrobefri luft fra kammeret til utsiden gjennom den åpne døren hindrer at uteluften kommer inn i kammeret.

Kammeret blir derfor ikke forurenset med mikroberene som er til stede i uteluften, selv om døren holdes åpnet under inokulering eller overføring av media. En UV-lampe montert inne i kammeret steriliserer kammeret før drift.

Den har en rustfritt stålplattform med bestemmelse for gassrørtilkobling for en bunsenbrenner. Før bruk, blir plattformen rengjort og desinfisert med lysol, bunsenbrenneren er tilkoblet og deretter lukkes glassdøren.

UV-lyset slås på i 10 minutter for å sterilisere miljøet inne i kammeret og deretter slås av. Glassdøren skal aldri åpnes når UV-lampen lyser, fordi UV-lys har skadelig effekt på hud og syn. Blåseren er slått på og deretter åpnes glassdøren.

Nå lyser bunsenbrenneren og mediaoverføring eller inokulering utføres i kammeret aseptisk. Hvis ekstremt farlige mikrober skal håndteres, brukes et laminært strømningskammer med hansker som projiserer inn i kammeret fra glassdøren, da inokuleringen må gjøres for å holde inngangsdøren lukket.

22. Elektronisk celleteller:

Det brukes til å regne direkte antall bakterier i en gitt væskeprøve. Et eksempel på elektronisk celleteller er "Coulter-telleren". I dette utstyret får en suspensjon av bakterieceller passere gjennom en minuttåpning, over hvilken en elektrisk strøm strømmer.

Motstanden ved åpningen er elektronisk registrert. Når en celle passerer gjennom åpningen, er ikke-leder, øker den motstanden øyeblikkelig. Antall ganger motstanden øker øyeblikkelig, registreres elektronisk, noe som indikerer antall bakterier tilstede i væskeprøven.

23. Membranfiltreringsapparat:

Visse stoffer som urea desintegrerer og mister deres opprinnelige egenskaper, hvis de steriliseres ved varme. Slike stoffer steriliseres ved hjelp av membranfiltreringsapparater. I dette apparatet filtreres løsningen av stoffet som skal steriliseres gjennom et membranfilter, som ikke tillater bakterieceller å passere ned. Filtrering gjøres under sugetrykk for å øke filtreringshastigheten (Figur 2.19, side 30).

24. Mikroskoper:

Ulike typer mikroskoper brukes til visuell observasjon av morfologi, motilitet, flekker og fluorescensreaksjoner av bakterier.

25. Datamaskiner:

Datamaskiner brukes vanligvis til analyse av resultater. De brukes også til å identifisere bakterier lett innen få timer. Ellers er identifikasjon av bakterier en kjedelig prosess og tar dager sammen for å identifisere en bakterieart.

Datamaskinene som brukes til å identifisere bakterier, er Apple II, IBM PC og TRS-80 og deres moderne varianter. Hvert forskningspersonell på laboratoriet skal forsynes med en datamaskin, sammen med internettfasilitet.

26. Spektrofotometer:

Det er et instrument for måling av forskjellene i fargeintensiteter av løsninger. En stråle av lys med en bestemt bølgelengde passerer gjennom testløsningen og mengden lys absorbert (eller overført) måles elektronisk.

Et enkelt synlig spektrofotometer kan passere lys med bølgelengder innenfor synlig rekkevidde, mens et UV-cum-synlig spektrofotometer kan passere lys med bølgelengder i både ultrafiolett og synlig rekkevidde. I mikrobiologisk laboratorium brukes den til direkte telling av bakterier i suspensjon, så vel som til andre formål.

27. Elektriske enheter:

En svingning av elektrisk spenning i laboratoriet er en av de viktigste årsakene, noe som reduserer utstyrets levetid og noen ganger ødelegger dem. Derfor bør alle spenningsfølsomme utstyr forsynes med spenningsbeskyttelsesanordninger som stabilisatorer, servostabilisatorer eller konstant spenningstransformatorer (CVT) i henhold til anbefalingene fra produsentene av utstyret.

Datamaskiner, balanser og noe sofistikert utstyr skal kobles til via uavbrutt strømforsyning (UPS), da eventuelle sammenbrudd i strømforsyningen under driften kan skade noen av deres følsomme komponenter alvorlig.

Laboratoriet skal ha en høykapasitetsgenerator for å gi elektrisk strøm til hele laboratoriet ved strømbrudd. Dette skyldes at strømbrudd ikke bare bringer laboratorieaktiviteten til stillstand, det gir også uønskede irreversible endringer i prøvene som er lagret i kjøleskapene.

28. Automatisk Bakterieidentifikasjonssystem:

Det er et instrument som brukes til automatisk datamaskinassistert identifisering av bakterier (figur 3.13 og 3.14). Den konvensjonelle metoden for å identifisere bakterier er svært lang og besværlig.

Det handler hovedsakelig om farging, motilitetstest, kulturelle egenskaper, en rekke biokjemiske tester og endelig å søke navnet på bakteriene i Bergey's Manual of Determinative Bacteriology ved å matche resultatene med de tilgjengelige i håndboken. Det automatiske identifikasjonssystemet for bakterier identifiserer bakteriene på veldig kort tid.

Systemet, som VITEK 2 (Figur 3.14), bruker engangskort. Ett kort er nødvendig for å identifisere en bakterie. Systemet kan huse en serie kort, som kan ordnes på en kassett, og dermed muliggjøre identifisering av flere bakterier om gangen.

Hvert kort har flere brønner. Vanligvis er det 8 rader med 8 brønner hver (8X8 = 64 brønner). Brønnene inneholder forskjellige dehydrerte medier som kreves for forskjellige biokjemiske tester. Et kapillærrør er festet til hvert kort, hvilket suger suspensjonen av bakterier som skal identifiseres og dispenseres i alle brønnene.

De dehydrerte medier i brønnene blir hydratisert av suspensjonsvæsken, og derved tillater vekst av bakteriene. Etter en foreskrevet inkuberingsperiode registreres fargeendringene i alle brønner automatisk i systemet.

Resultatene av fargeendringene går til en datamaskin som er koblet til systemet. Datamaskinen sammenligner automatisk resultatene med de som er tilgjengelige i biblioteket for forskjellige bakterier, og gir endelig navnet på bakteriene med en bestemt sannsynlighet.

For identifikasjon blir de oppgitte bakteriene, dyrket som isolert koloni på en plate eller som ren kultur dyrket på en skråning, tatt. En lapful av bakteriene overføres aseptisk til steril saltoppløsning i et reagensrør og en suspensjon av bakteriene er laget.

Suspensjonen skal inneholde en foreskrevet tetthet av bakterier, bestemt av et densitometer. Testrøret festes til kassetten og et kort er festet nær det, slik at spissen av sugekapillarrøret på kortet forblir dypt nedsenket i suspensjonen.

Flere slike testrør og kort er festet til hver kassett, avhengig av antall bakterier som skal identifiseres. Kassetten settes inn i vakuumkammeret i systemet. Et høyvakuum opprettes inne i kammeret, noe som tvinger bakteriesuspensjonen til å bli sugd inn i kapillærrørene og dispensert inn i brønnene på kortene.

Kassetten tas ut og settes inn i inkubasjons- og analysekammeret. Her kapillærrørene kuttes og kuttene ender seg automatisk. Deretter starter inkubasjonsprosessen ved en foreskrevet temperatur i en foreskrevet periode, som er programmert av kontrollpanelet. Under inkubasjon, hvert 15. minutt, går hvert kort automatisk til fargeleseren, som leser fargeendringene i brønnene og registrerer dem.

De registrerte resultatene går til datamaskinen, som automatisk sammenligner dem med de som er tilgjengelige i biblioteket for forskjellige bakterier. Endelig gir den navnene til bakteriene med bestemte sannsynligheter. De brukte kortene faller inn i avfallshåndteringskammeret i systemet for fjerning og endelig avhending etter sterilisering.

De anerkjente automatiske identifikasjonssystemene for bakterier er VITEK 2 og API. Mens VITEK 2 virker på ovenstående prinsipp, bruker API (Analytical Profile Indexing) -systemet (Figur 3.13) en litt annen metode for automatisk identifisering av bakterier, som involverer manuell inokulasjon og ekstern inkubasjon.

29. PCR-termocykler, kjøletentrifuge, ultra-sentrifugering, gaskromatografi (GC), høyytelsesvæskekromatografi (HPLC), tynnsjiktkromatografi (TLC), papirkromatografi, kolonnekromatografi og elektroforeseenhet:

Disse er instrumenter som brukes til isolering, rensing og identifikasjon av biokjemiske stoffer, som bakterielt DNA, plasmider, mikrobielle toksiner etc. Polymeraskjedereaksjon (PCR) er et viktig verktøy i nukleinsyrebaserte metoder. Det er en arbeidshest i moderne mikrobiologi og bioteknologilaboratorier.